酸性木聚糖酶(ACX)測(cè)試盒
測(cè)定方法: 微量法
測(cè)定規(guī)格: 100T/48S
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個(gè)月
注 意 : 正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產(chǎn)生,能催化水解木聚糖,也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶,可分解釀造或飼料工業(yè)中的原料細(xì)胞壁以及β-葡聚糖,因而廣泛的應(yīng)用于釀造和飼料工業(yè)中,ACX一般分離自耐酸的及部分霉菌。
測(cè)定原理:
ACX在酸性環(huán)境下能將木聚糖降解成還原性寡糖和單糖,進(jìn)一步在沸水浴條件下與3,5-二硝基水楊酸發(fā)生顯色反應(yīng),在540nm處有特征吸收峰,反應(yīng)液顏色的深淺與酶解產(chǎn)生的還原糖量成正比,通過(guò)測(cè)定反應(yīng)液在540nm吸光值增加速率,可計(jì)算ACX活力。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:
天平、低溫離心機(jī)、恒溫水浴鍋,可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
粗酶提取:
1.發(fā)酵液:發(fā)酵液于8000g,4℃,離心15min,取上清,作為待測(cè)樣品。
2.酶干粉:稱約0.1mg,加1mL緩沖液溶解待測(cè)。
3.組織樣本:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL緩沖液)進(jìn)行冰浴勻漿,然后8000g,4℃,離心10min,取上清待測(cè)。