編號(hào)
成分
規(guī)格
試劑一
PCR MagicMix 3.0
1 mL（紅蓋）
試劑二
超純水
1 mL（亮黃色）
試劑三
草豆蔻PCR鑒定引物混合液
100 μL（白蓋）
試劑四
草豆蔻PCR鑒定陽性對照（1×10E8 /μL）
50 μL（黃蓋）
試劑五
使用手冊
1 份
運(yùn)輸及保存：
低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。陽性對照需要單獨(dú)放置，不要污染其他試劑。
自備試劑：
樣品 DNA。
草豆蔻PCR鑒定試劑盒
使用方法 ：
一、樣品 DNA 的制備：
1. 用自選方法純化N+2個(gè)樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容。可以選用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N個(gè)樣品，則需要做N+2個(gè)提取，包括一個(gè)樣品制備陽性對照和一個(gè)樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水（取決于試劑盒要求的樣品起始量）中加10μL草豆蔻PCR鑒定陽性對照的 1000 倍稀釋液而得，樣品制備陰性對照是直接用水。提取結(jié)束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（40μL 體系）：
3. 對N+2個(gè)樣品，在PCR時(shí)需要增加一個(gè)PCR陽性對照和一個(gè)PCR陰性對照，故需要設(shè)置N+4個(gè)反應(yīng)。在N+4個(gè)PCR管中分別加入下列成分：
|
成份 |
N+2 個(gè)樣品管 |
PCR 陰性對照 |
PCR陽性對照 |
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PCR Magic Mix 3.0 |
各 20μL |
20μL |
20μL |
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草豆蔻PCR鑒定引物混合液 |
各 2μL |
2μL |
2μL |
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N+2個(gè)樣品DNA模板 |
各18μL |
-- |
-- |
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PCR 陰性對照（水） |
-- |
18μL |
-- |
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PCR 陽性對照（草豆蔻PCR鑒定陽性對照1000倍稀釋液） |
-- |
-- |
18μL |
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過程 |
溫度 |
時(shí)間 |
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預(yù)變性 |
95℃ |
5 min |
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PCR 反應(yīng)（35 個(gè)循環(huán)） |
95℃ |
30 sec |
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55℃ |
30 sec |
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72℃ |
40 sec |
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延伸 |
72℃ |
7 min |