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簡單介紹：

精液基因組DNA提取試劑盒本試劑盒適用于精液基因組 DNA 的提取。試劑盒采用了獨特的細胞裂解體系降解蛋白，結合硅膠膜特異吸附核酸的原理，可快速純化得到高質量的基因組DNA。使用本試劑盒得到的基因組 DNA 無蛋白、核酸酶污染，可直接進行PCR、酶切和雜交等相關分子生物學實驗。

詳情介紹：

精液基因組DNA提取試劑盒

產品及特點

本試劑盒適用于精液基因組 DNA 的提取。試劑盒采用了獨特的細胞裂解體系降解蛋白，結合硅膠膜特異吸附核酸的原理，可快速純化得到高質量的基因組DNA。使用本試劑盒得到的基因組 DNA 無蛋白、核酸酶污染，可直接進行PCR、酶切和雜交等相關分子生物學實驗。

它具有下列特點：
1. 簡便快速，可快速獲得高純度的基因組 DNA；
2. 重復性好，產量高；
3. 完全去除污染物和抑制劑，便于下游應用。

成分規格

Buffer GL	12ml	25ml	50ml
Buffer GTL	12ml	25ml	50ml
Buffer W1（concentrate）	13ml	26ml	52ml
Buffer W2（concentrate）	15ml	30ml	60ml
Buffer EB	10ml	10ml	30ml
Proteinase K	1ml	2×1ml	4×1ml
Spin Column with Collection Tubes	50套	100套	200套
蛋白酶 K 于-20℃　，其他組分室溫（15 - 25℃），可保存12 個月
本產品僅供科研使用，不得用于其它用途

使用方法

自備試劑

DTT、無水乙醇、RNase A（可選）。

（注意：Buffer W1 和 Buffer W2 為濃縮液，按要求加入無水乙醇，用后及時蓋緊，以防乙醇揮發）

1. 吸取 50-100ul 新鮮或冷凍精液，加入200 ul Buffer GTL，再加入1MDTT30 ul混勻。

2. 加入 20 ul Proteinase K 溶液，充分混勻，在 56℃放置，直至組織完全溶解。

3. 加入 200 ul Buffer GL，充分混勻，70℃水浴或金屬浴處理10 min，期間每隔一段時間震蕩離心管，溶液變得清亮后短暫離心，以去除管蓋內壁的水珠。

（注意：Buffer GL 加入時可能會產生白色沉淀，一般70℃時會消失，不影響后續實驗，如溶液未變清亮，說明細胞裂解不徹底，可能導致提取的DNA量少或者提取的DNA不純）

4. 加入 200 ul 無水乙醇，充分震蕩，此時可能會出現絮狀沉淀，短暫離心以去除管蓋內壁水珠。

5. 將所得溶液和絮狀沉淀轉移到離心吸附柱中，12,000 rpm 離心30 sec，棄收集管中的濾液。

6. 向吸附柱內加入 500 ul Buffer W1，室溫12,000 rpm離心30 sec，棄收集管中濾液。

（注意：Buffer W1 為濃縮液，按要求加入無水乙醇，用后應立即蓋緊瓶蓋以防酒精揮發）

7. 向吸附柱內加入 600 ul Buffer W2，室溫 12,000 rpm 離心30 sec，棄收集管中濾液。
（注意：Buffer W2 為濃縮液，按要求加入無水乙醇，用后應立即蓋緊瓶蓋以防酒精揮發）

8. 向吸附柱內加入 500 ul Buffer W2，室溫 12,000 rpm 離心2min，棄收集管中濾液。

9. 將離心吸附柱置于一個新的 1.5 ml 塑料離心管（自備）中，加入50 - 100 ul Buffer EB，室溫放置 2 min。10,000 rpm 離心 1 min，離心管底溶液即基因組DNA。

（注意：為增加洗脫效率，可將洗脫液在 60℃預熱。如需使用去離子水洗脫，可用NaOH調整其pH值在 7.0 - 8.5 之間，為了增加基因組 DNA 回收率，可將得到的溶液重新加入到離心管中，室溫放置2 min，再次離心收集）

注意事項

1. 如 Buffer GTL 和 Buffer GL 產生沉淀，可在 56℃水浴溶解。
２. 樣品應避免反復凍融，否則會導致提取的 DNA 片段小，提取量下降。

３. 所有離心步驟均為臺式離心機，室溫下操作。

4. 按要求在 Buffer W1/W2 中加入無水乙醇。

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