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ELISA檢測試劑盒添加的步驟
日期:2024-12-22 03:38
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摘要:
ELISA檢測試劑盒的原理基于特異性抗體與待檢測分子之間的特異性結合反應。一般而言,ELISA包括固相抗體的固定、樣品的加入、特異性抗體的結合、酶標記抗體的結合以及底物的添加等步驟。具體步驟如下:
1. 固相抗體的固定:在檢測板上涂覆特異性抗體。這些抗體通常被固定在多孔板表面,如96孔板。固相抗體的選擇取決于待測分子的特異性。
2. 樣品的加入:將待測樣品加入涂有固相抗體的檢測孔中,讓樣品中的目標分子與固相抗體結合。
3. 特異性抗體的結合:經過洗滌步驟后,特異性抗體(標記抗體)與已結合在固相上的目標分子結合。特異性抗體通常與酶標記結合,以便后續檢測步驟中的酶活性測量。
4. 酶標記抗體的結合:經過洗滌步驟后,酶標記抗體與特異性抗體結合,形成特異性抗體-酶標記抗體復合物。該復合物具有較強的酶活性。
5. 底物的添加:加入適當的底物,使酶標記的特異性抗體產生可測量的信號。底物的選擇取決于所使用的酶。
通過測量底物的反應產物,可以確定目標分子的存在和濃度。ELISA檢測試劑盒的原理靈敏度高、特異性強,因此成為許多生物學實驗研究和臨床診斷中的優選方法。