ELISA實(shí)驗(yàn)原理簡(jiǎn)單，步驟少，流程短，試劑盒操作相對(duì)簡(jiǎn)便，實(shí)驗(yàn)小白也能輕松上手。然而，實(shí)驗(yàn)上手雖快，想要得到可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，卻并不那么容易。
    洗板在ELISA過(guò)程中雖不是一個(gè)反應(yīng)步驟，但卻是決定試驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。ELISA就是靠洗板來(lái)達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的，通過(guò)洗板以清洗殘留在板孔中沒(méi)能與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在反應(yīng)過(guò)程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯等塑料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，而在洗板時(shí)應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來(lái)。在ELISA操作中，洗滌是主要的關(guān)鍵技術(shù)，應(yīng)嚴(yán)格按要求洗滌。洗板如不徹底，有酶結(jié)合物的非特異性吸附，將使空白值升高。另外，在間接法中如血清標(biāo)本內(nèi)的非特異性IgG吸附在固相上而未被洗凈，也將與酶標(biāo)記抗體作用而產(chǎn)生干擾。
1.各廠家的洗液是根據(jù)各自試劑的條件配制的，因此采用不配套的洗液常會(huì)得到不正常的反應(yīng)結(jié)果，包括本底升高，所以不同廠家的洗液不應(yīng)混用。
 2. 洗液應(yīng)按規(guī)定的倍數(shù)稀釋使用。試劑盒提供的洗液是濃縮的，過(guò)多稀釋洗液，會(huì)影響洗液的效果，而使反應(yīng)的本底升高。反之造成假陰性。
 3. 稀釋洗液的水應(yīng)該是新鮮的蒸餾水，電導(dǎo)率小于1.5us/cm。如果水中含有過(guò)多的鈣、鎂離子，這些離子會(huì)占用表面活性劑，使試驗(yàn)本底增高。
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