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ELISA實驗的樣本為什么都要進行稀釋工作
日期：2024-12-22 23:27
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摘要：ELISA試劑盒實驗稀釋血清的進程：
先把蛋白稀釋必定的倍數，比如說10倍、20倍稀釋（這樣可以大體判定一個參數），將抗原進行一系列稀釋包被微量反應板，再用必定稀釋度的陽性參看血清和陰性參看血清進行孵育后洗刷，再加酶結合物進行反應，經孵育洗刷后，加底物溶液顯色，中止反應后分別測定O.D值，選擇O.D值≥1.0的那個抗原稀釋度為zui適包被濃度。一般總是要選擇那個O.D值稍大于1.0，而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參看血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求陽性參看血清和陰性參看血清的O.D值有明顯不同。
ELISA試劑盒很多人都是知道的...
ELISA試劑盒實驗稀釋血清的進程：
先把蛋白稀釋必定的倍數，比如說10倍、20倍稀釋（這樣可以大體判定一個參數），將抗原進行一系列稀釋包被微量反應板，再用必定稀釋度的陽性參看血清和陰性參看血清進行孵育后洗刷，再加酶結合物進行反應，經孵育洗刷后，加底物溶液顯色，中止反應后分別測定O.D值，選擇O.D值≥1.0的那個抗原稀釋度為zui適包被濃度。一般總是要選擇那個O.D值稍大于1.0，而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參看血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求陽性參看血清和陰性參看血清的O.D值有明顯不同。
ELISA試劑盒很多人都是知道的，那你知道嗎，其實每一份ELISA試劑盒里邊都有著一份說明書，里邊介紹了樣本稀釋的份額。這時候就有很多人就要問了，為什么ELISA實驗的樣本都要進行稀釋作業？
在ELISA試劑盒實驗血清為什么要稀釋？有兩個原因：
1）比賽按捺比較明顯，應稀釋比賽物；
2）以下降非特異性反應，使特異性的抗原抗體反應充分體現出來。
血清稀釋用一般的PBS即可，可加1％的BSA，能有用下降ELISA本底，當然假設你嫌費事我覺得用生理鹽水代替PBS也不大。不管你是用直接比賽仍是直接比賽，血清的稀釋倍數必定要事前判定，但也不必一點點，你做一個預實驗即可，選擇OD在1.0左右的稀釋倍數，即你的比賽ELISA中陰性孔OD在1.0，這樣作出來的曲線比較靈敏。
先把蛋白稀釋必定的倍數，比如說10倍、20倍稀釋（這樣可以大體判定一個參數），將抗原進行一系列稀釋包被微量反應板，再用必定稀釋度的陽性參看血清和陰性參看血清進行孵育后洗刷，再加酶結合物進行反應，經孵育洗刷后，加底物溶液顯色，中止反應后分別測定O.D值，選擇O.D值≥1.0的那個抗原稀釋度為zui適包被濃度。一般總是要選擇那個O.D值稍大于1.0，而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參看血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求陽性參看血清和陰性參看血清的O.D值有明顯不同。
ELISA試劑盒很多人都是知道的，那你知道嗎，其實每一份ELISA試劑盒里邊都有著一份說明書，里邊介紹了樣本稀釋的份額。這時候就有很多人就要問了，為什么ELISA實驗的樣本都要進行稀釋作業？
在ELISA試劑盒實驗血清為什么要稀釋？有兩個原因：
1）比賽按捺比較明顯，應稀釋比賽物；
2）以下降非特異性反應，使特異性的抗原抗體反應充分體現出來。
血清稀釋用一般的PBS即可，可加1％的BSA，能有用下降ELISA本底，當然假設你嫌費事我覺得用生理鹽水代替PBS也不大。不管你是用直接比賽仍是直接比賽，血清的稀釋倍數必定要事前判定，但也不必一點點，你做一個預實驗即可，選擇OD在1.0左右的稀釋倍數，即你的比賽ELISA中陰性孔OD在1.0，這樣作出來的曲線比較靈敏。