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關(guān)于動物ELISA試劑盒檢測樣品注意事項
日期：2024-12-22 07:06
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摘要：動物ELISA試劑盒做標準曲線樣品檢測時有幾個問題需要注意
1、樣品的濃度等指標是根據(jù)標準曲線計算出來的，所以首先要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事，否則后面的實驗結(jié)果無從談起。
2、設(shè)置標準曲線樣品的標準濃度范圍要有一個比較大的跨度，并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度，即樣品的濃度要在標準曲線濃度范圍之內(nèi)，包括上限和下限。而對于呈S型的標準曲線，盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度zui陡段，即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi)。
3、采用倍比稀釋法配制標準曲線中的標準樣品濃度，這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會出現(xiàn)較大的偏離。
4、檢測標準樣品時，應(yīng)按濃度遞增順序進行，以減少高濃度對低濃度的影響，提高準確性。
5、標準曲線的樣品數(shù)一般為7個點，但至少要保證有5個點。
6、做出的標準曲線相關(guān)系數(shù)因?qū)嶒炓蟛煌兴儎樱话銇碚f，相關(guān)系數(shù)R至少要大于0.98，對于有些實驗，至少要0.99甚至是0.999。
動物ELISA試劑盒做標準曲線樣品檢測時有幾個問題需要注意
1、樣品的濃度等指標是根據(jù)標準曲線計算出來的，所以首先要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事，否則后面的實驗結(jié)果無從談起。
2、設(shè)置標準曲線樣品的標準濃度范圍要有一個比較大的跨度，并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度，即樣品的濃度要在標準曲線濃度范圍之內(nèi)，包括上限和下限。而對于呈S型的標準曲線，盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度zui陡段，即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi)。
3、采用倍比稀釋法配制標準曲線中的標準樣品濃度，這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會出現(xiàn)較大的偏離。
4、檢測標準樣品時，應(yīng)按濃度遞增順序進行，以減少高濃度對低濃度的影響，提高準確性。
5、標準曲線的樣品數(shù)一般為7個點，但至少要保證有5個點。
6、做出的標準曲線相關(guān)系數(shù)因?qū)嶒炓蟛煌兴儎?，但一般來說，相關(guān)系數(shù)R至少要大于0.98，對于有些實驗，至少要0.99甚至是0.999。
動物ELISA試劑盒收集樣品、處理及保存方法：
1.血清：操作過程中避免任何細胞刺激。收集血液后，1000*g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離
2.血漿：EDTA，檸檬酸鹽，肝素血漿可用于檢測。1000*g離心30分鐘去除顆粒。
3.細胞上清液：1000*g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4.組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000*g離心10分鐘，取上清液。
5.保存：如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70°C保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血活高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37°C或更高的溫度加熱解凍。
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