ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測定時(shí)，受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。
ELISA法由于操作簡略，已被廣泛應(yīng)用，咱們就來談?wù)?a href="http://bp6x2.cn/shtwsy_Product_2063699080.html" class="keyword_inherit" name="keyword_inherit" target="_blank">ELISA試劑盒需把握的關(guān)鍵有哪些?
1. 在儲(chǔ)存及孵育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。一切試劑瓶蓋須蓋緊以避免蒸發(fā)和污染，試劑避免受到微生物的污染，因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致呈現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。
2. 小心汲取試劑并嚴(yán)格遵守給定的孵育時(shí)刻和溫度。請(qǐng)注意在汲取標(biāo)本/規(guī)范品，酶結(jié)合物或底物時(shí)，一個(gè)孔與一個(gè)孔加樣之間的時(shí)刻距離假如太大，將會(huì)導(dǎo)致不同的“預(yù)孵育”時(shí)刻，然后明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。
3. 試劑盒保存:部分試劑保存于-20C，部分試劑保存于2-8C，具體以標(biāo)簽上的標(biāo)示為準(zhǔn)。
4. 濃洗滌液會(huì)有鹽分出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
5. 剛敞開的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì)，此為正常現(xiàn)象，不會(huì)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
6. 一切的樣品都應(yīng)管理好，依照規(guī)則的程序處理樣品和檢測設(shè)備。