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文件名稱: | 牛玻連(VN)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書 |
公司名稱: | 上海通蔚實(shí)業(yè)有限公司 |
下載次數(shù): | 180 |
文件詳細(xì)說明: | |
牛玻連(VN)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
檢測(cè)范圍:96T
使用目的:
本試劑盒用于測(cè)定牛血清、血漿及相關(guān)液體樣本中玻連(VN)含量。
實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中牛玻連(VN)。用純化的牛玻連(VN)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入玻連(VN),再與 HRP,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏(VN)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD標(biāo)記的玻連(VN)抗體色的深淺和樣品中的玻連值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中牛玻連(VN)濃度。
試劑盒組成:
標(biāo)本要:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因 NaN3抑制辣根過(HRP)活性。
牛玻連(VN)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,然后再待測(cè)樣品 10μl(樣品終稀釋度為 5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后37℃溫育30分鐘。 4.配液:將 30倍濃30倍稀釋后備用 5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜30秒后棄去,如此重復(fù) 5次,拍干。 6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。 7.溫育:操作同 3。 8.洗滌:操作同 5。 9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘. 10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。 11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后 15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
操作程序總:
計(jì)算:
牛玻連(VN)酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項(xiàng):
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