離子結合型果膠(ISP)含量測試盒

測定方法： 微量法
測定規格： 100管/48樣
保存條件： 低溫避光保存
有 效 期： ６個月
注    意：   正式測定前取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

 測定意義：

果膠是構成細胞初生壁和中膠層的主要成分，主要由原果膠、果膠酸甲酯和果膠酸組成。果膠中含有半乳糖醛酸、乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等，是許多高等植物細胞壁中含量豐富的多糖成分，其獨特的物理、化學性質影響著植物源食品的口感和品質。果膠間以Ca2+橋及其他離子鍵、氫鍵、糖苷鍵、酯鍵和苯環偶聯的方式交聯，通過不同的抽提方法可以提取各種形式的果膠，如水溶性果膠（WSP）、離子結合型果膠（ISP）和共價結合果膠（CSP）。

測定原理：

利用帶有螯合劑的酸溶液提取離子結合型果膠（ISP），采用咔唑比色法測定果膠含量。果膠水解成半乳糖醛酸，在硫酸溶液中與咔唑試劑進行縮合反應，生成物質在530 nm處有大吸收峰。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、80％乙醇、丙酮、濃硫酸（不允許快遞）、研缽和蒸餾水。

樣品的前處理： 
1、細胞壁的提取：取約0.3g樣本，加入1mL 80％乙醇，室溫快速勻漿，95℃水浴20min，冷卻至室溫，4000g 25℃離心10min，棄上清。沉淀加入1.5mL80％乙醇和丙酮各洗一遍（渦旋振蕩2min左右，4000g 25℃離心10min，棄上清即可），沉淀即為粗細胞壁，加入1mL試劑一（去除淀粉）浸泡15小時，4000g 25℃離心10min，棄上清，將沉淀干燥，稱重得細胞壁物質（CWM）。
2、ISP的提取：稱取烘干的CWM 3mg，加入1mL試劑二，充分勻漿(若烘干物質質地堅硬，可先研碎后再加入1mL試劑二勻漿，或者用勻漿器勻漿)。8000g 4℃離心10min，取上清液待測。