淀粉磷酸化酶(SP)測試盒
測定方法:   微量法
測定規格:   100管/96樣
保存條件:    低溫避光保存
有 效 期:     6個月
注  ?意:     正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義:
淀粉磷酸化酶(Starch Phosphorylase,SP)是淀粉代謝過程 的可逆反應酶,既可催化淀粉的合成,也可催化淀粉的分解。
在高等植物中,淀粉磷酸化酶(合成方向)主要存在于質體中,負責延長淀粉的 α-1,4- 葡萄糖鏈的非還原末端;淀粉磷酸化酶(分解方向)主要存在于細胞質基質中,催化淀粉中的 α-1,4-糖苷鍵磷酸解產生葡萄糖-1-磷酸,負責葡萄糖鏈的磷酸解,是淀粉代謝過程中的關鍵酶。
在植物體中,淀粉磷酸化酶分解方向的底物無機磷濃度比合成方向的底物葡萄糖-1-磷酸濃度幾乎高了兩個數量級,一般認為淀粉磷酸化酶只催化淀粉的分解,因此,分解方向的淀粉磷酸化酶具有重要測定意義。

測定原理:
淀粉磷酸化酶催化淀粉中的 α-1,4-糖苷鍵與無機磷反應產生葡萄糖-1-磷酸,葡萄糖-1-磷酸在磷酸葡萄糖變位酶的作用下產生葡萄糖-6-磷酸,并在 6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化下還原NADP+產生 NADPH,使 340nm 下吸光值增加。

需自備的儀器和用品:
酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、96 孔板、研缽、冰和蒸餾水。

樣本的前處理:
1、組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液)進行冰浴勻漿,然后 10000g,4℃,離心 10min,取上清待測。
2、按照細胞數量(104 個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細胞加入 1mL 提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率 300w,超聲 3 秒,間隔 7 秒,總時間 3min);然后 10000g,4℃,離心 10min,取上清置于冰上待測。