產品詳情
簡單介紹:
一步法sgRNA 合成試劑盒廠家現貨由上海通蔚生物品牌公司提供,包括一步法sgRNA 合成試劑盒規格;價格;包裝;說明書等產品的詳細介紹,售后有保障,歡迎新老客戶前來選購。
詳情介紹:
一步法sgRNA 合成試劑盒
本產品僅供體外研究使用,不得用于臨床診斷
描述:
CRISPR/Cas9 是一種由 RNA 指導 Cas 核酸酶對靶向基因進行特定 DNA 修飾的技術,也是為應對噬菌體和外源質粒的攻擊而演化來的一種獲得性免疫防御機制。此系統的工作原理是通過人工優化的具有引導作用的sgRNA(Single Guide RNA)引導核酸酶 Cas9 蛋白在與 sgRNA 配對的靶位點處剪切雙鏈 DNA,引起 DNA 斷裂,進而利用生物體內非同源末端修復機制或同源重組機制修復 DNA,導致基因移碼突變、替換或刪除,致使基因功能喪失。sgRNA 的體外合成通常有兩種策略:一種為構建含特異性序列的轉錄質粒,另一種則使用合成的 oligo 退火延伸生成含 T7 轉錄啟動子的雙鏈 DNA 分子,進而再使用 T7 RNA 聚合酶進行體外轉錄,從而獲得 sgRNA。利用合成的 Oligo直接制備 sgRNA,具有操作簡單快速、可實現高通量等優勢,已經成為體外合成 sgRNA 的方案。Cas9 的切割是通過向導 RNA(gRNA)與靶 DNA 形成約 20bp 堿基的配對,且靶序列的 3’端需要有 PAM 結構(NGG),再引導 Cas9 作用實現的。本試劑盒可通過一步反應獲得高純度、高產量的 sgRNA,僅需要合成一條含有特定靶標序列的 Oligo,可在 4h 內獲得 30~50μg 的 sgRNA。提供多種規格,詳情可以咨詢客服訂購。