產品詳情
簡單介紹：
游離DNA提取試劑盒本試劑盒適用于從新鮮或冷凍的血漿、血清和無細胞體液中提取高質量的游離DNA，也可以用于提取外泌體攜帶的DNA。獨特的緩沖液/蛋白酶K體系能迅速裂解游離的DNA和蛋白復合物，降解蛋白，DNA 吸附于硅基質膜上，通過快速的漂洗、離心步驟，去除雜質，得到高純度的游離 DNA。本試劑盒操作簡單、快速，所得游離 DNA 不含蛋白、核酸酶和其他雜質，可直接用于常規 PCR 和實時熒光定量 PCR 等分子生物學實驗。
詳情介紹：
產品及特點
本試劑盒適用于從新鮮或冷凍的血漿、血清和無細胞體液中提取高質量的游離DNA，也可以用于提取外泌體攜帶的DNA。獨特的緩沖液/蛋白酶K體系能迅速裂解游離的DNA和蛋白復合物，降解蛋白，DNA 吸附于硅基質膜上，通過快速的漂洗、離心步驟，去除雜質，得到高純度的游離 DNA。本試劑盒操作簡單、快速，所得游離 DNA 不含蛋白、核酸酶和其他雜質，可直接用于常規 PCR 和實時熒光定量 PCR 等分子生物學實驗。
它具有下列特點：
它具有下列特點：
1. 簡便快速：1 小時內可獲得高純度的游離 DNA；
2. an全：無需有機溶劑抽提，使用an全；
3. 穩定：所得 DNA 純度高，重復性好，方便下游應用。
成分規格
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Buffer GL |
12ml |
25ml |
50ml |
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Buffer W1（concentrate） |
13ml |
26ml |
52ml |
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Buffer W2（concentrate） |
15ml |
30ml |
60ml |
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Buffer EB |
10ml |
10ml |
30ml |
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Proteinase K |
1ml |
2×1ml |
4×1ml |
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Spin Column with Collection Tubes |
50套 |
100套 |
200套 |
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蛋白酶 K 于-20℃，Buffer DT 于 4℃儲存，其他試劑與物品儲存于室溫（15-25℃）。 |
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本產品僅供科研使用，不得用于其它用途 |
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使用方法
自備試劑無水乙醇。
1. 向離心管（自備）中加入 20 ul Proteinase K。
2. 向離心管中加入 200 ul 血清、血漿或無細胞體液，再加入200 ul Buffer GL渦旋震蕩充分混勻。
（注 意：為確保樣本有效裂解，加入 Buffer GL 后，需將樣本與 Buffer GL 充分混勻。）
3. 56℃孵育 10 min，短暫離心，將管壁上的溶液收集到管底。
3. 56℃孵育 10 min，短暫離心，將管壁上的溶液收集到管底。
4. 加入 250 ul 無水乙醇，渦旋震蕩 15 sec，室溫放置 5 min，短暫離心，將管壁上的溶液收集到管底。
(注 意：如果環境溫度超過 25℃，無水乙醇應在冰上預冷后使用)
5. 將一個吸附柱放入收集管中，將上一步所得溶液轉移到離心吸附柱中，10,000rpm離心 1 min，棄收集管中的廢液。
6. 向吸附柱內加入 500 ul 的 Buffer W1，室溫 10,000 rpm 離心1 min，棄收集管中廢液。（注意：Buffer W1 中含有乙醇，用后及時蓋緊，以防乙醇揮發）
7. 向吸附柱內加入500 ul的Buffer W2，室溫10,000 rpm 離心1 min，棄收集管中廢液。
（注 意： Buffer W2 按要求加入無水乙醇，用后及時蓋緊，以防乙醇揮發；如需進一步提高DNA純度，可重復步驟 7 一次。）
8. 室溫 12,000 rpm 離心 3 min，甩干殘留液體。
（注 意：此步不能省略，否則殘留乙醇會影響后續使用）
9. 將離心吸附柱置于一個新的 1.5 ml 塑料離心管（自備）中，小心打開吸附柱的蓋子，室溫放置 2 min，使吸附膜完全變干。加入 20 ~ 50 ul 的洗脫液Buffer EB，室溫放置2 min。10,000 rpm 離心 2 min，離心管底溶液即游離 DNA。
（注 意：為增加洗脫效率，可將洗脫液在60℃預熱。如需使用去離子水洗脫，可用NaOH調整其pH值在7.0 ~ 8.5之間，為了增加 DNA 回收率，可將得到的溶液重新加入到離心管中，室溫放置2min，再次離心收集）
注意事項
1. 實驗前在 Buffer W1 和 Buffer W2 中按標簽說明加入無水乙醇；
2. 如緩沖液 Buffer GL、Buffer W1 結晶或產生沉淀，可在 56℃水浴溶解；
3. 所有離心步驟均為室溫下操作。
