產品詳情
簡單介紹：
干血斑基因組DNA提取試劑盒(0.1-1ML)本試劑盒采用可以特異性結合 DNA 的離心吸附柱和獨特的緩沖液系統，提取干血斑 中的基因組 DNA。所提 DNA 分子純度高，可直接進行 PCR、Real-Time PCR 和雜交等相 關分子生物學實驗，整個過程an全可靠、簡單快速。
詳情介紹：
產品及特點
本試劑盒采用可以特異性結合 DNA 的離心吸附柱和獨特的緩沖液系統，提取干血斑 中的基因組 DNA。所提 DNA 分子純度高，可直接進行 PCR、Real-Time PCR 和雜交等相 關分子生物學實驗，整個過程an全可靠、簡單快速。
它具有下列特點：
它具有下列特點：
1. 簡便快捷：操作快速方便；
2. 穩定可靠：得率高，純度好，重復性強。
成分規格
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Buffer GTL |
15ml |
30ml |
60ml |
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Buffer GL |
15ml |
30ml |
60ml |
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Buffer EB |
10 ml |
10 ml |
30ml |
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Buffer W1（concentrate） |
13ml |
26ml |
52ml |
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Buffer W2（concentrate） |
15ml |
30ml |
60ml |
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Proteinase K |
1ml |
2×1ml |
4×1 ml |
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Spin Columnwith Collection Tubes |
50套 |
100套 |
200套 |
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蛋白酶K 于-20℃, 其他組分室溫（15 - 25℃),可保存 12 個月。 |
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本產品僅供科研使用，不得用于其它用途 |
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使用方法
自備試劑
無水乙醇、RNase A（可選）。
樣本采集、保存和運送
1. 樣本：按照濾紙干血斑采集方法進行采集。
2. 樣本保存：經上述采集的待測樣本可立即用于處理，或在密封，干燥（濕度低于30%）， 2-8°C 條件下保存（此條件下可保存 5 年）。樣本運送時應將濾紙干血斑密封，采用泡 沫箱加冰運輸。
提取步驟
（注 意：使用前請先在緩沖液 Buffer W1 和 Buffer W2 中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶上的標簽）
1. 取三片 3×3 mm 的干血斑樣品到 1.5 ml 的離心管（自備）中，加入 200 ul Buffer GTL，
20 ul 蛋白酶 K ，混合均勻，56℃恒溫震蕩器中，900 rpm 恒溫震蕩 1 h。
2. 加入 200 ul Buffer GL 渦旋混勻，70℃恒溫震蕩器中，900 rpm 恒溫震蕩 10 min。
3. 加入 200 ul 無水乙醇，渦旋震蕩充分混勻，短暫離心收集管壁上的液體。
4. 將一吸附柱放入收集管中，將液體全部轉入到吸附柱中，10000 rpm離心30 s ，棄濾 液。
5. 向吸附柱中加入 500 ul Buffer W1 ，10000 rpm 離心 30 s ，棄濾液。
（注 意：按要求在 Buffer W1 中加入無水乙醇，用后及時蓋緊， 以防乙醇揮發）
6. 向吸附柱中加入 600 ul 漂洗液 Buffer W2 ，10000 rpm 離心 30 s ，棄濾液。
（注 意：按要求在 Buffer W2 中加入無水乙醇，用后及時蓋緊， 以防乙醇揮發）
7. 重復操作步驟 6 一次。
（注 意：此步不能省略，否則殘留乙醇會影響基因組 DNA 的后續使用）
8. 將吸附柱放回收集管中，12,000 rpm 離心 2 min ，以去除吸附膜上的乙醇。
9. 將吸附柱轉入一干凈的離心管中，向吸附膜的中間部位懸空滴加 20 - 50 ul Buffer EB， 室溫放置 2 min ，10000 rpm 離心 1 min ，收集 DNA。
(注 意：洗脫液體積不應少于 20 μl ，體積過小影響回收效率。為增加基因組 DNA 的得率，可將離心 得到的溶液再次加入吸附柱中，室溫放置 2 min ，10000 rpm 離心 1 min 。洗脫液的 pH 對于洗脫效率 有很大影響。若用水作洗脫液應保證其 pH 值在 7.0 - 8.5 范圍內，pH 值低于 7.0 會降低洗脫效率)
注意事項
1. 如 Buffer GTL 和 Buffer GL 產生沉淀，可在 56℃水浴溶解。
2. 樣品應避免反復凍融，否則會導致提取的 DNA 片段小，提取量下降。
3. 所有離心步驟均為臺式離心機，室溫下操作。
