產品詳情
簡單介紹：
2×Taq PCR MasterMix(不含染料)本產品包含 Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR 反應增強劑、優化劑以及穩定劑，濃度為 2×。具有快速簡便、靈敏度高、特異性強、穩定性好等優點，可大限度地減少人為誤差。
詳情介紹：
產品特點
本產品包含 Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR 反應增強劑、優化劑以及穩定劑，濃度為 2×。具有快速簡便、靈敏度高、特異性強、穩定性好等優點，可大限度地減少人為誤差。
它具有下列特點：
它具有下列特點：
1. 顯著提高 PCR 的特異性和靈敏度；
2. 多次凍融或長期放于 4℃不會影響活性；
3. 應用簡便，減少誤差，降低了對 PCR 條件的要求；
4. 不含染料的 MasterMix 產品在 PCR 結束后需混合適量的上樣緩沖液再上樣電泳，含染料的 MasterMix 產品在 PCR 結束后可以直接上樣電泳。
成分規格
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產品名稱 |
規格 |
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2×Taq PCR MasterMix(含染料) |
1ml/5×1ml |
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2×Taq PCR MasterMix(不含染料) |
1ml/5×1ml |
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20℃可保存12個月 |
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本產品僅供科研使用 ，不得用于其它用途 |
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使用方法
（注 意：以下舉例為常規PCR體系和反應條件，實際操作中應根據模板、引物結構和目的片段大小不同進行相應的調整和優化）
1. PCR體系 推薦反應體系(20μl)
（注 意：引物濃度請以終濃度 0.1 - 1.0 uM 作為設定范圍的參考。擴增效率不高的情況下，可提高引物的濃度；發生非特異性反應時，可降低引物濃度，由此優化反應體系）
2. PCR程序
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過程 |
溫度 |
時間 |
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預變性 |
94℃ |
2min |
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25－35cycles |
變性 |
94℃ |
30sec |
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退火 |
55-65℃ |
30sec |
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延伸 |
72℃ |
1kb/30sec |
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終延伸 |
72℃ |
2min |
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注 意：
A 一般實驗中退火溫度比擴增引物的熔解溫度 Tm 低 5℃，無法得到理想的擴增效率時，適當降低退火溫度；發生非特異性反應時，提高退火溫度，由此優化反應條件。
B 延伸時間應根據所擴增片段大小設定，Taq DNA Polymerase 的擴增效率為1kb/30 sec。
C 可根據擴增產物的下游應用設定循環數。如果循環次數太少，擴增量不足；如果循環次數太多，錯配機率會增加，非特異性背景嚴重。所以，在保證產物得率的前提下，應盡量減少循環次數）
3. 結果檢測
反應結束后取5 μl反應產物，加入適量上樣緩沖液（含染料的不用加），然后進行瓊脂糖凝膠電泳檢測。