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上海通蔚帶您了解細胞樣本的收集以及處理方法
日期:2024-12-22 22:18
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摘要:上海通蔚帶您了解細胞樣本的收集以及處理方法
-般采用0.05 mol/L Tris-HCl, pH 7.4 磷酸鹽緩 沖液(PBS),客戶可根據樣本及測定指標的情況自行設定濃度,目的是保持樣本的等滲環境。
細胞的處理具體有以下方法:
1、細胞沉淀的收集:
收細胞時要盡量避免細胞破碎,因為收集后要離心、去上清,破碎細胞的蛋白會被洗掉。
收集好的細胞沉淀加細胞裂解液提蛋白,如果蛋白濃度較高需要稀釋,是用細胞裂解液稀釋。
在細胞沉淀中加入0. 5-1ml的PBS (等滲), 輕輕 顛倒混勻,將培養液在室溫條件下1000轉/分,離心10分鐘,棄.上清留細胞沉淀。
在細胞沉淀中加入-定量的PBS (PBS的加入量根據所測指標的不同而1手工勻漿:在細胞沉淀中加入-定量的pbs(pbs的加入量根據所測指標的不同而)有所改變,-般加入0. 5ml,細胞密度不小于一百萬個/ml),混勻,將細胞懸浮于PBS中,有所改變,-般加入0.5毫升,細胞密度不小于一百萬個/ml),混勻,將細胞懸浮于pbs中用移液器將細胞懸浮液移至玻璃勻漿管中(2ml玻璃勻漿管),將玻璃勻漿管置于冰水混合物中,手動勻漿3分鐘,然后取破碎好的細胞懸浮液進行測定。