文章詳情
小鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒的操作步驟
日期:2024-12-22 03:38
瀏覽次數:474
摘要:小鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒的操作步驟
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
小鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒的操作步驟
背景[1-3]
小鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒用于測定血清、血漿及相關液體樣本中小鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)含量。
小鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒
樣本處理要求
1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2.血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
小鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒的操作步驟
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
背景[1-3]
小鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒用于測定血清、血漿及相關液體樣本中小鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)含量。
實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)水平。用純化的小鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入小鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2),再與HRP標記的小鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)濃度。
小鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒
樣本處理要求
1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2.血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
小鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒的操作步驟
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。