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細(xì)胞培養(yǎng)的注意要點(diǎn)

日期:2024-12-22 10:54
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摘要:1.細(xì)胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥的清洗及布局 ①保持細(xì)胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥內(nèi)的整潔有序,將所有物品置于直視范圍內(nèi)。 ②向放入通風(fēng)櫥內(nèi)的所有物品噴灑70%乙醇,擦拭清潔。 ③在通風(fēng)櫥中部開(kāi)闊處放置細(xì)胞培養(yǎng)容器;移液器置于右方易于取用;試劑和培養(yǎng)基置于右后方便于吸取;試管架置于中后部;小型容器置于左后部用于盛放廢液。 2.培養(yǎng)瓶/皿等物品的無(wú)菌操作 無(wú)菌培養(yǎng)瓶、試劑瓶、培養(yǎng)皿等物品使用時(shí)方可揭開(kāi)蓋子,不得將其開(kāi)放暴露于環(huán)境中,操作完成后盡快蓋上蓋子,取下蓋子時(shí)應(yīng)將蓋子開(kāi)口朝下放在工作臺(tái)面上。進(jìn)行無(wú)菌操作時(shí)不要說(shuō)話、唱歌或吹口哨。盡快完成實(shí)驗(yàn),以盡量避免污染。 3.細(xì)胞培養(yǎng)中可能的污染物 細(xì)胞培養(yǎng)污染物主要分為兩類: ①化學(xué)污染物,如培養(yǎng)基、血清和水中的雜質(zhì)、增塑劑和去污劑。 ②生物污染物,如霉菌、酵母、病毒、支原體以及其他細(xì)胞系的交叉污染。 可通過(guò)充分了解污染源以及采用良好的無(wú)菌技術(shù),降低污染發(fā)生的頻率和嚴(yán)重程度。
細(xì)胞培養(yǎng)(cell culture)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境(無(wú)菌、適宜溫度、酸堿度和一定營(yíng)養(yǎng)條件等),使之生存、生長(zhǎng)、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù),在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對(duì)于整個(gè)生物工程技術(shù),還是其中之一的生物克隆技術(shù)來(lái)說(shuō),細(xì)胞培養(yǎng)都是一個(gè)必不可少的過(guò)程,細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的大規(guī)模克隆。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過(guò)大量培養(yǎng)成為簡(jiǎn)單的單細(xì)胞或極少分化的多細(xì)胞,這是克隆技術(shù)必不可少的環(huán)節(jié),而且細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的克隆。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)研究方法中重要和常用技術(shù),通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)既可以獲得大量細(xì)胞,又可以借此研究細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞的合成代謝、細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖等。
細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中需要注意的一些要點(diǎn),一起來(lái)看看吧。
1.細(xì)胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥的清洗及布局
①保持細(xì)胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥內(nèi)的整潔有序,將所有物品置于直視范圍內(nèi)。
②向放入通風(fēng)櫥內(nèi)的所有物品噴灑70%乙醇,擦拭清潔。
③在通風(fēng)櫥中部開(kāi)闊處放置細(xì)胞培養(yǎng)容器;移液器置于右方易于取用;試劑和培養(yǎng)基置于右后方便于吸取;試管架置于中后部;小型容器置于左后部用于盛放廢液。
2.培養(yǎng)瓶/皿等物品的無(wú)菌操作
無(wú)菌培養(yǎng)瓶、試劑瓶、培養(yǎng)皿等物品使用時(shí)方可揭開(kāi)蓋子,不得將其開(kāi)放暴露于環(huán)境中,操作完成后盡快蓋上蓋子,取下蓋子時(shí)應(yīng)將蓋子開(kāi)口朝下放在工作臺(tái)面上。進(jìn)行無(wú)菌操作時(shí)不要說(shuō)話、唱歌或吹口哨。盡快完成實(shí)驗(yàn),以盡量避免污染。
3.細(xì)胞培養(yǎng)中可能的污染物
細(xì)胞培養(yǎng)污染物主要分為兩類:
①化學(xué)污染物,如培養(yǎng)基、血清和水中的雜質(zhì)、增塑劑和去污劑。
②生物污染物,如霉菌、酵母、病毒、支原體以及其他細(xì)胞系的交叉污染。
可通過(guò)充分了解污染源以及采用良好的無(wú)菌技術(shù),降低污染發(fā)生的頻率和嚴(yán)重程度。